Evaluación de virus papiloma humano de alto y bajo riesgo oncogénico en la cavidad bucal de pacientes VIH positivos / Evaluation of human papillomavirus of high and low oncogenic risk in the oral cavity of HIV positive patients

Objetivo. Realizar la detección y tipificación de virus papiloma humano (VPH) en la cavidad bucal de un grupo de pacientes VIH positivos, atendidos en el Centro de Atención de Pacientes con Enfermedades Infectocontagiosas (CAPEI) de la Facultad de Odontología-Universidad Central de Venezuela. Métodos. Se evaluaron 31 hisopados bucales de pacientes VIH positivos para la infección por VPH, mediante el Sistema de Hibridación Reversa de INNO-LiPA que detecta 28 genotipos de VPH de alto y bajo riesgo oncogénico. Resultados. El 61,0% de las muestras evaluadas presentó infección por VPH. El genotipo 6 fue el más frecuente (73,68%), seguido de los genotipos 18, 11 y 16 con 63,16%, 37,0% y 32,0% respectivamente. El 74,0% de las muestras positivas para VPH presentaron infecciones múltiples, siendo más frecuente la coinfección mixta (35,70%) con los genotipos de VPH-6/18 de bajo y alto riesgo oncogénico, 21,40% con los genotipos 6/11/18 y 6/11, cada una. Seguido de 14,30% de las muestras que presentaron infección con VPH-6/11/16/18 y 7,10% con los genotipos 11/16 de bajo y alto riesgo oncogénico. Conclusiones. La alta frecuencia de infección con VPH de alto riesgo oncogénico y la presencia de múltiples genotipos observada en la cavidad bucal de individuos VIH positivos, que no presentaron lesiones compatibles con esta infección en el examen extra e intrabucal, indica que los métodos moleculares de diagnóstico son importantes en la detección de infecciones subclínicas y latentes, lo que puede permitir un mejor seguimiento y manejo más oportuno de estos pacientes con mayor riesgo de desarrollar neoplasias malignas en la cavidad bucal.

Objective. Perform human papilomavirus (HPV) detection and typing in the oral cavity in a group of HIV positive patients, treated at the Center for Care of Patients with Infectious Diseases (CAPEI) of the Faculty of Dentistry-Central University of Venezuela. Methods. Thirty-one oral swabs from HIV-positive patients were evaluated to detect HPV infection using the INNO-LiPA Reverse Hybridization System that detects 28 HPV genotypes of high and low oncogenic risk. Results. The 61.0% of the evaluated samples had an HPV infection. The low risk genotype 6 was the most frequent (73.68%), followed by genotypes 18, 11 and 16 with 63.16%, 37.0%, and 32.0%, respectively. Seventy-four percent of HPV positive samples had multiple infections, being the more frequent the mixed coinfection (35.70%), with HPV genotypes 6/18 of low and high oncogenic risk, 21.40% with genotypes 11/6/18 and 6/11, each one, followed by 14.30% of the samples presented infection with HPV-6/11/16/18 and 7.10% with the 11/16 genotypes of low and high oncogenic risk. Conclusions. The high frequency of infection with high oncogenic risk HPV types and the presence of multiple genotypes observed in the oral cavity of HIV positive patients, who did not present lesions compatible with this infection in the extra and intraoral examination, indicates that molecular diagnostic methods are important in the detection of subclinical and latent infections, which may allow better follow-up and more timely management of these patients with a higher risk of developing malignant lesions in the oral cavity

Cytokines and MMPs levels in gingival crevicular fluid from patients with chronic periodontitis before and after non-surgical periodontal therapy

The study of host response in periodontal disease may provide a mechanism to monitor disease progression. the purpose of the present research was to determine the levels of IL-1alfa, IL-1beta, TNF-alfa, IL-6, IL-6sR, IL-8, IL-10, MMP-3 and MMP-8 in gingival crevicular fluid (GCF), before and after non-surgical periodontal treatment (NSPT) in order to evaluate therapy response. methodology: eleven patients diagnosed with chronic periodontitis and eleven healthy subjects were selected for this study. clinical measurements, including probing depth (PD) and clinical attachment loss (CAL) were carried out in patients diagnosed with chronic periodontitis and periodontal healthy controls. the clinical indexes evaluated were: gingival index (GI) and plaque index (PI). samples of GCF were taken from one tooth per quadrant before and 45 days after NSPT. the levels of inflammatory mediators were measured by ELISA. results: the values of all clinical parameters decressed significsntly after treatment. the concentration levels of all cytokines and MMP-3 and MMP-8 in the GCF sample were higher in patients diagnosed with chronic periodontitis compared to the healthy group. all inflammatory mediators decreased after therapy, but did not reach control values; IL-6, Il-6sR, IL-10 and TNF-alfa, attained the highest reduction (70 percent -54 percent); the vales of MMP3, IL-1alfa, IL-1beta and IL-8 were reduced between 50 percent ­ 34 percent; and MMP-8 showed the lowest decrease (28 percent). conclusion: all clinical parameters and cytokines levels decreased after NSPT. the mediators TNF-alfa IL-6, IL-6sR, and IL-10 showed the largest variation between before and after NSPT and could thus be used to evaluate therapy response.

Comparación de la detección y tipificación del virus del papiloma humano en muestras citológicas y de orina en pacientes del sexo femenino / Comparison of the detection and typing of human papilloma virus in cytological samples vs. urine samples in female patients

El cáncer de cuello uterino, es el segundo más frecuente en mujeres a nivel mundial; la infección por Virus de Papiloma Humano (VPH) de alto riesgo oncogénico, es el principal factor etiológico de esta malignidad. La identificación viral se logra mediante métodos moleculares sensibles y específicos como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que generalmente utiliza hisopados cervicales o biopsias como material biológico. Debido a las complicaciones e incomodidad que implica la toma de estas muestras, se realizan estudios en otras más accesibles como la orina. Por lo que se realizó la detección y tipificación de VPH en muestras de hisopados endocervicales y de orina, se compararon los resultados obtenidos y se evaluó la efectividad del uso de esta última. La extracción del material genético se realizó con el estuche comercial AXYGEN. Para la detección y la tipificación viral se empleó la técnica de PCR en tiempo final. La positividad para VPH fue 68,6% en los hisopados cervicales y 62,9% en las muestras de orina de, valores similares y comparables a estudios previos. Así mismo, la concordancia obtenida entre los resultados de las muestras empleadas respecto a los tipos virales identificados fue “moderada” (k=0,609), encontrándose además valores altos de sensibilidad y especificidad de 83,3% y de 81,8% respectivamente al usar muestras de orina. Estos resultados apuntan a la posibilidad de desarrollar un diagnóstico efectivo para VPH empleando muestras de orina, ya que reducirían la intervención de personal adiestrado para su toma, costos y la incomodidad para las pacientes.

Cervical cancer is the second most common cancer in women worldwide. Infection with high oncogenic risk Human Papillomavirus (HPV) is the main etiological factor of this malignancy. Viral identification is achieved by sensitive and specific molecular methods, such as polymerase chain reaction (PCR), which are generally used on cervical biopsies or swabs of biological material. Because of the complications and discomfort that taking these samples implies, studies are conducted with other samples obtained from less invasive methods, such as urine. Accordingly, detection and genotyping of HPV in endocervical swabs and urine were performed to compare results and to evaluate the effectiveness of using the latter samples. The genetic material was obtaining using the commercial kit Axygen. For viral detection and typing the conventional PCR technique was used. Positivity for HPV in cervical swabs was 68.6% and 62.9% in urine samples, similar values and comparable to previous studies. Likewise, the concordance obtained between the results of the samples used with respect to the identified viral types was “moderate” (k = 0.609), with high values of sensitivity and specificity of 83.3% and 81.8%, respectively, when urine samples were used. These results point to the possibility of developing an effective diagnosis for HPV using urine samples, because it would reduce the intervention of trained personnel, cost and discomfort for the patients.

Prevalence of HPV and EBV infection andtheir relationship with the p53 and PCNA expression in oral carcinoma patients

Introduction: Infection caused by potentially oncogenic viruses, such as HPV and EBV, favors the role of certain oncoproteins that can induce dysplasias and malignant lesions. Objective: To evaluate the prevalence of HPV and EBV and their relation with the expression of p53 and PCNA in patients with oral carcinoma. Methodology: Twenty-seven oral squamous cell carcinomas (OSCC) were evaluated; DNA extraction was conducted using the QIAamp DNA mini kit; viral detection was obtained using the INNO-LiPA kit for HPV, and nested PCR was used for EBV. The evaluation of molecular markers was performed through immunohistochemical staining. Results: The mean age of the patients was 60.55 +/- 13.94 years, and 52 percent of these were female. Of the patients, 59 percent were tobacco users and 63 percent were alcohol consumers. HPV was detected in 70 percent of the patients with the predominance of genotype 16 (60 percent). As for EBV infection, it was observed in 59 percent of cases. p53 and PCNA immunopositivity corresponded to 44 percent and 59 percent, respectively. The tongue was the anatomical location with highest positivity for both viruses as well as for the expression of molecular markers. The 48 percent of the cases presented infection by both viruses. Conclusion: HPV and EBV infection together with the expression of p53 and PCNA were more frequently observed in advanced stages of the disease, suggesting a more relevant role in the progression than in tumor genesis.

Detection of EBV, CMV and HSV-1 in subgingival samples of HIV positive and negative patients with chronic periodontitis / Detección de VEB, CMV y VHS-1 en muestras subgingivales de pacientes VIH positivos y negativos con periodontitis crónica

Abstract: objective: to detect the presence of infection by EBV (Epstein-Barr Virus), CMV (Cytomegalovirus) and HSV-1 (Herpes Simplex Virus type 1) in subgingival samples from HIV- positive patients under HAART (High Activity Antiretroviral Therapy), HIV- positive patients without HAART, HIV-negative patients with chronic periodontitis and healthy controls. Methodology: Crevicular fluid samples of 11 HIV+ patients on therapy were evaluated, 6 without antiretroviral therapy, 7 HIV- negative subjects with chronic periodontitis and 7 periodontally-healthy controls. PI (Plaque index), GI (Gingival Index), PD (probing depth) and CAL (Clinical Attachment Loss) were registered at six sites per each tooth in all teeth and subgingival plaque samples of a tooth were collected per quadrant. Nested PCR was used to detect EBV and endpoint PCR to detect infection by CMV and HSV-1. Results: Clinical parameters showed statistically significant differences between HIV-positive patients and subjects with chronic periodontitis compared with the control group (p<0.05). DNA of EBV was detected mainly in HIV-positive patients under HAART, 91 percent (10/11). DNA of CMV was detected mainly in patients without HAART, 67 percent (4/6), while HSV-1 was observed in 27 percent (3/11) of patients under HAART. In the control group no virus was detected. Coinfection was observed in 50 percent of HIV patients without HAART, 36 percent of HIV patients with HAART and 14 percent of HIV-negative with chronic periodontitis. Conclusion: Viral infection was prevalent in HIV patients under HAART and EBV was the primary viral infection detected in HIV-positive patients with chronic periodontitis.

Resumen: detectar la presencia de infección por VEB (Virus Epstein-Barr), CMV (Citomegalovirus) y VHS-1 (Virus Herpes simple tipo 1) en muestras subgingivales de pacientes VIH-positivos bajo HAART (Terapia Anti Retroviral de Alta Actividad), VIH-positivos sin HAART, pacientes VIH-negativos con periodontitis crónica y controles sanos. Metodología: Se evaluaron muestras de fluido crevicular de 11 pacientes VIH+ bajo terapia, 6 sin terapia antiretroviral, 7 sujetos VIH–negativo con periodontitis crónica y 7 controles periodontalmente sanos. Se registró el IP (Índice de placa), IG (Índice Gingival), PS (Profundidad del Sondaje) y NIC (Nivel de Inserción Clínica) en seis sitios por diente en todos los dientes y se recolectaron muestras de placa subgingival de un diente por cuadrante. Se empleó PCR anidada para detectar VEB y PCR punto final para identificar la infección con CMV y VHS-1. Resultados: Los parámetros clínicos mostraron diferencias estadísticamente significativas entre pacientes VIH-positivos y sujetos con periodontitis crónica comparados con el grupo control (p<0.05). El ADN de EBV fue detectado principalmente en pacientes VIH-positivos bajo HAART con 91 por ciento (10/11). El ADN de CMV se detectó principalmente en pacientes sin HAART, 67 por ciento (4/6), mientras que VHS-1 se observó en 27 por ciento (3/11) de los pacientes bajo HAART. En el grupo control no se detectó ningún virus. La coinfección fue observada en 50 por ciento de los pacientes VIH sin HAART, 36 por ciento de los VIH con HAART y 14 por ciento de los VIH negativos con periodontitis crónica. Conclusión: La infección viral fue predominante en los pacientes VIH bajo HAART y VEB fue la principal infección viral detectada en los pacientes VIH positivos y con periodontitis crónica.

Cytokine and metalloproteinases in gingival fluid from patients with chronic periodontitis / Niveles de citocinas y metaloproteinasas en fluido gingival de pacientes con periodontitis crónica

The purpose of the present research was to determine the levels of IL-1α, IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-6sR, IL-8, IL-10, MMP-3 and MMP-8 in gingival crevicular fluid (GCF) of subjects with chronic periodontitis. Clinical measurements were carried out in 20 patients with chronic periodontitis and 11 periodontally healthy controls. The clinical indexes evaluated were: gingival index (GI), plaque index (PI), bleeding on probing (BOP), probing depth (PD) and clinical attachment loss (CAL); the measurements were taken at six sites per tooth in all teeth in each subject. GCF samples were taken from one tooth per quadrant, and the levels of mediators were measured using an ELISA test. Statistically significant differences were observed between patients and control group in relation to all clinical parameters evaluated (p<0.05). The gingival concentrations, in pg/mL, of IL-1α (patients: 239.06 ± 65.5 vs control: 97.79 ± 15.81), IL-1β (patients: 157.19 ± 36.4 vs control: 63.44 ± 19.04), TNF-α (patients: 10.87 ± 1.7 vs control: 1.15 ± 0.84), IL-6 (patients: 3.77 ±1.7 vs control: 0.43 ± 0.22), IL-6Sr (patients: 655.59 ± 185.8 vs control: 73.59 ± 23.18), IL-8 (patients: 496.3 ± 155.3 vs control: 206.13 ± 46.63), IL-10 (patients: 10.75 ± 3.6 vs control: 2.41 ± 0.57), MMP-3 (patients: 3531 ± 1558.2 vs control: 724.84 ± 289.51) and MMP-8 (patients: 8231.70± 1279.2 vs control: 1534.67± 814.90) were significantly greater in patients with periodontal disease than in the control group (p<0.001). The higher levels of the cytokines and metalloproteinases obtained in this study were significantly associated with the severity of the periodontal disease.

El propósito de la presente investigación fue determinar los niveles de IL-1α, IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-6sR, IL-8, IL-10, MMP-3 and MMP-8 en fluido gingival crevicular (FGC) de sujetos con periodontitis crónica. Se evaluaron los parámetros clínicos en 20 pacientes con periodontitis crónica y 11 controles periodontalmente sanos. Los índices clínicos evaluados fueron: indice gingival (IG), indice de placa dental (IP), sangramiento al sondaje (SS), profundidad del saco (PS) y nivel de inserción (NI). Las muestras de FGC fueron tomadas de un diente por cada cuadrante y los niveles de los mediadores fueron medidos utilizando la prueba de ELISA. Se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los pacientes y el grupo control en relación a todos los parámetros clínicos evaluados (p<0,05). Las concentraciones en fluido gingival en pg/mL de IL-1α(pacientes: 239,06 ± 65,5 vs control: 97,79 ± 15,81), IL-1β (pacientes: 157,19 ± 36,4 vs control: 63,44 ± 19,04), TNF-α (pacientes: 10,87 ± 1,7 vs control: 1,15 ± 0,84), IL-6 (pacientes: 3,77 ±1,7 vs control: 0,43 ± 0,22), IL-6Sr (pacientes: 655,59 ± 185,8 vs control: 73,59 ± 23,18), IL-8 (pacientes: 496,3 ± 155,3 vs control: 206,13 ± 46,63), IL-10 (pacientes: 10,75 ± 3.6 vs control: 2,41 ± 0,57), MMP-3 (pacientes: 3531 ± 1558,2 vs control: 724,84 ± 289,51) and MMP-8 (pacientes: 8231,70± 1279,2 vs control: 1534,67± 814,90), estuvieron significativamente mayores en pacientes con enfermedad periodontal que en el grupo control. (p<0,001). Los niveles elevados de citocinas y metaloproteinasas obtenidos en este estudio estuvieron significativamente asociados con la severidad de la enfermedad periodontal.

Papilomatosis laríngea juvenil y su relación con la infección genital por virus de papiloma humano durante el embarazo / Laryngeal papillomatosis youth and their relationship with infection Genital human papilloma virus during pregnancy

OBJETIVO: establecer la relación entre el diagnóstico de papilomatosis laríngea juvenil y la infección genital por virus de papiloma humano durante el embarazo. MÉTODOS: Se incluyeron 18 madres de hijos con diagnóstico de papilomatosis laríngea juvenil. Se revisaron las historias de los niños, se realizó anamnesis a las madres buscando antecedentes de infección por virus de papiloma humano durante el embarazo, se practicó evaluación ginecológica actual, citología, vulvoscopia, vaginoscopia, colposcopia y biopsia, de ser necesario. Se tomaron muestras para tipificación viral. RESULTADOS: Hubo 120 casos de papilomatosis laríngea juvenil entre 14 400 pacientes, para una frecuencia de 0,8 %. Entre los pacientes evaluados, predominó el sexo masculino (61,1 %). La edad al momento del diagnóstico fue de 5,7 ± 3,2 años. La enfermedad tenía una mediana de evolución de 2 años. La mediana del número de intervenciones quirúrgicas requeridas por paciente, fue 3. Las manifestaciones clínicas más frecuentes fueron disnea (83,3 %), y disfonía (61,1 %). El genotipo viral en las lesiones laríngeas fue 6 (50 %), 11 (11,1 %) y coinfección 6 y 11 (11,1 %). Se detectó virus de papiloma humano en 5 madres: 3 de alto riesgo y 2 no tipificables. La vía del parto vaginal fue la más frecuente con un 83,3 %. CONCLUSIONES: La papilomatosis laríngea es poco frecuente (0,8 %), genera un cuadro de severidad variable caracterizado por disnea y disfonía, es producido por papilomavirus humano 6 y 11 y se asocia al nacimiento vía vaginal. No hubo correlación entre los tipos virales de madres e hijos.

OBJECTIVE: to establish the relationship between the diagnosis of juvenile laryngeal papillomatosis and genital infection with human papilloma virus during pregnancy. METHODS: 18 mothers whose children’s diagnoses were juvenile laryngeal papillomatosis were included. The children’s history were checked, the mothers were given the anamnesis procedure looking for human papilloma virus infections during pregnancy, they were given actual gynecologic evaluations, citology, vulvoscopy, vaginoscopy, colposcopy and biopsy where needed. Samples were taken for their viral tipification. RESULTS: There were 120 cases of juvenile laryngeal papillomatosis in 14400 patients, an 0.8% frecuency. Amongst the evaluated patients, most were males (61.1 %). Age at diagnosis was 5.7 ± 3.2 años. The disease had an evolution median time of 2 years. The medical intervention median per patient was 3. The most frecuent clinical manifestations were disnea (83.3 %) and dysphonia (61.1%). The viral genotype on laryngeal lesions was 6 (50%), 11 (11.11 %) and coinfection 6 y 11 (11.1 %). Human papilloma virus was detected in 5 mothers: 3 high risk and 2 non classifiable. Vaginal birth was the most frequent with an 83.3 % rate. CONCLUSION: Juvenile laryngeal papillomatosis is not very frequent (0.8 %), generates a manifestation of variable severity characterized by dysnea and dysphonia, produced by human papillomavirus 6 and 11 and is associated to vaginal birth. There was no correlation between the viral types of mothers and children.

Posible transmisión vertical de virus de papiloma humano en niños cuyas madres presentan antecedentes de infección viral

Objetivo: Detección y tipificación de virus de papiloma humano en muestras de niños cuyas madres tienen historia asociada al virus. Métodos: Estudio transversal y descriptivo. Se procesaron 66 hisopados perianales de niños con un promedio de edad de 18 meses atendidos en el Servicio de Dermatología del Hospital Universitario de Caracas. La detección viral se realizó mediante PCR con iniciadores genéricos MY11 y MY09; la tipificación de las muestras positivas en la detección se llevó a cabo mediante PCR múltiple. Resultados: Se obtuvo un porcentaje de positividad de 54,5 % y se identificó VPH de bajo riesgo oncogénico en 47,2 %, ADN viral de alto riesgo en 13,88 % e infecciones mixtas con tipos de alto y bajo riesgo oncogénico en 5,55 % de las muestras positivas. El 33,33 % de estas muestras no pudo ser tipificado con la metodología utilizada. Conclusiones: Aunque no se tienen datos del tipo viral en las madres para hacer comparaciones con los tipos identificados en los niños, estos resultados ponen en evidencia la posible transmisión vertical del VPH, considerando los antecedentes maternos, la corta edad de los niños y que la condición de abuso sexual fue descartada. Es recomendable hacer el seguimiento de la población estudiada con la incorporación de la evaluación de muestras obtenidas de los padres.

Objective: Detection and typing of Human Papillomavirus in samples of children whose mothers have a history associated with the virus. Methods: Transversal and descriptive study. Perianal swabs of 66 children with an average age of 18 months treated in the Service of Dermatology, University Hospital of Caracas, were processed. Viral detection was performed by PCR with MY11 and MY09 generic primers; typing of positive samples was performed by multiplex PCR. Results: A positive percentage of 54.5 % was obtained and low oncogenic risk HPV identified in 47.2 %, high-risk viral DNA in 13.88 % and mixed infections with types of high and low oncogenic risk in 5.55 % of the positive samples. 33.33 % of these samples could not be typed with the used methodology. Conclusions: Although the viral type is unknown in mothers to make comparisons with the types identified in children, these results highlight the possible vertical transmission of HPV, considering maternal history, the young age of the children and that the condition of sexual abuse was ruled out. It is recommended to monitor the studied population including the evaluation of samples obtained from the parents.

Detección del virus de papiloma humano en muestras de pacientes con ectropión cervical

Objetivo: Detección subclínica del virus de papiloma humano en muestras de pacientes diagnosticadas con ectropión cervical, para evaluar la prevalencia de la infección viral asociada a dicha condición. Métodos: El ADN fue extraído utilizando solventes orgánicos (fenol/cloroformo-alcohol isoamílico). La detección del virus de papiloma humano se realizó mediante PCR con iniciadores genéricos MY09/MY11 y para la tipificación de las muestras positivas se utilizó un kit comercial de PCR múltiple. Ambiente: Laboratorio de Genética Molecular-Instituto de Oncología y Hematología. Resultados: Se obtuvo una positividad de 26 % (13/50 muestras analizadas) para la presencia de ADN del virus de papiloma humano. De las muestras positivas, 38,45 % resultó virus de papiloma humano de alto riesgo oncogénico (tipo 16 o 18), mientras que otro 38,45 % correspondió a virus de papiloma humano de bajo riesgo (tipos 6, 11 o infección mixta 6/11) y 23,07 % no pudo ser tipificado con la metodología utilizada. Conclusión: Aunque este resultado no fue estadísticamente significativo, señala la necesidad de mayor seguimiento clínico de las pacientes positivas, especialmente aquellos casos correspondientes a virus de papiloma humano de alto riesgo oncogénico, ya que presentan mayor probabilidad de desarrollar cáncer cervical.

Objective: In this study was conducted subclinical human papillomavirus detection in samples from patients diagnosed with cervical ectropion to assess the prevalence of human papillomavirus infection associated with this condition. Methods: DNA was extracted with organic solvents (phenol /chloroform- isoamylic). Human papillomavirus detection was performed by PCR with generic primers MY09 and MY11 and the viral typing was performed using a commercial MPCR kit. Setting: Laboratorio de Genetica Molecular-Instituto de Oncologia y Hematologia; Results: The results showed that 26 % of the evaluated sample (13/50) was positive for the presence of human papillomavirus genome. Viral typing test identified high- oncogenic risk human papillomavirus (types 16 or 18) in 38.45.% of the positives cases. Likewise, 38.45 % was low oncogenic risk (types 6, 11 or mixed infection with 6/11 human papillomavirus) and 23.07 % could not be typified with the used methodology. Conclusions: Although this result is not statistically significant, the virus latent presence highlights the need for greater medical surveillance for positive patients, especially in cases where detected 16 and 18 high-risk oncogenic human papillomavirus types, because they may have increased risk of cervical cancer.

Niveles de MMP-3 y MMP-8 en pacientes con periodontitis crónica antes y después del tratamiento periodontal no quirúrgico / MMP-3 and MMP-8 levels in patients with chronic periodontitis before and after nonsurgical periodontal therapy

En la periodontitis crónica (PC) se desencadenan procesos inmunoinflamatorios, donde se liberan metaloproteinasas de la matriz (MMPs), enzimas involucradas en la degradación de la matriz extracelular, las cuales pueden ser detectadas en el fluido gingival crevicular (FGC). El propósito del estudio fue determinar los niveles de MMP-3 y MMP-8 en FGC, antes y después del tratamiento periodontal no quirúrgico (TPNQ) para evaluar actividad de la enfermedad y respuesta terapéutica. Once pacientes con periodontitis crónica y 11 controles sanos fueron seleccionados. Se evaluaron los parámetros clínicos: índice gingival, índice de placa, profundidad al sondaje y pérdida de inserción; en todos los dientes de cada individuo y en seis sitios por diente. Muestras de FGC fueron tomadas de un diente por cuadrante, con profundidad de saco ≥ 4mm y pérdida de inserción ≥ 5 mm, los niveles de MMP-3 y MMP-8 fueron determinados por ELISA. Diferencias estadísticamente significativas fueron observadas entre los parámetros clínicos del grupo control y los pacientes con PC antes del tratamiento, registrándose posterior al TPNQ disminución significativa de todos los índices. Las concentraciones iniciales de MMP-3 y 8 en el grupo con PC fueron significativamente mayores a las obtenidas luego del TPNQ y en el grupo control, sin observar correlación entre parámetros clínicos y niveles de MMPs. La disminución significativa de los valores de MMP-3 y 8 en FGC de los pacientes con PC, posterior al TPNQ, indican la participación importante de estas enzimas en la degradación del tejido, y la efectividad del tratamiento periodontal para su control.

Immune-inflammatory processes are trigged in chronic periodontitis (CP), where matrix metalloproteinases (MMPs) are released and involved in the degradation of the extracellular matrix components that can be detected in the gingival crevicular fluid (GCF). The purpose of the study was to determine the levels of MMP-3 and MMP-8 in GCF, before and after nonsurgical periodontal treatment (NSPT), to evaluate disease activity and therapy response. Eleven patients with PC and eleven healthy controls were selected. Clinical measurements to evaluate gingival index (GI), plaque index (PI), probing depth (PD) and clinical attachment loss (CAL) were made in all the teeth of each individual and in six sites per tooth. GCF samples were taken from one tooth per quadrant, with a pocket depth ≥ 4 mm and a clinical attachment loss ≥ 5 mm, and the levels of MMP-3 and MMP-8 measured using an ELISA test. Statistically significant differences in clinical parameters were observed (p < 0.05) between patients with CP and control groups before the periodontal treatment, with significant decrease in all indexes after the NSPT. The initial concentrations of MMP-3 and MMP-8 were significantly higher than those obtained after the NSPT and in the control group, without observing a correlation between the clinical parameters and the levels of MMPs. Increased levels of MMP-3 and MMP-8 in the GCF of patients with PC declined significantly after NSPT, and the difference between the levels in healthy individuals and patients, suggests the important participation of these MMPs in tissue destruction in PC disease.

Extracción de ADN de muestras incluidas en parafina sin el uso de xilol para la detección y tipificación de VPH / DNA extraction from paraffin embedded samples without using xylene for HPV detection and typing

En el presente trabajo se llevó a cabo la extracción de ADN de biopsias cervicales con informe citológico de lesión intraepitelial cervical, incluidas en bloques de parafina, utilizando el “QIAamp DNA mini kit” (QIAGEN, Alemania) y la detección del Virus de Papiloma Humano (VPH). En el procedimiento original se eliminó la incubación en xilol, reduciendo los lavados del material biológico; la calidad de los ADNs extraídos fue probada mediante PCR para la detección del gen de la β-globina y del VPH, obteniéndose 84,3% y 28,1% de positividad, respectivamente. Estos resultados fueron comparables a los de otros trabajos similares y evidencian la obtención de ADN celular amplificable por PCR a partir de muestras parafinadas, que pudo ser utilizado eficientemente en procedimientos moleculares, eliminando la toxicidad del xilol y disminuyendo la manipulación del material biológico al reducir los lavados.

In the present study, DNA from cervical biopsies with a cytological report of intraepithelial cervical lesion and embedded in paraffin blocks was extracted using the “QIAamp DNA mini kit” (QIAGEN, Germany), and the Human Papyloma Virus (HPV) was detected. In the original procedure, the xylene incubation was eliminated, therefore reducing the washes of the biological material; the quality of the DNA extracted was tested by PCR for detecting the β-globine gene and HPV, with 84.3% and 28.1% positivity, respectively. These results were comparable to those of other similar studies, and they demonstrate that it is possible to obtain PCR amplifiable cellular DNA from paraffin embedded samples which can be used efficiently for molecular procedures, eliminating xylene toxicity, and decreasing the manipulation of the biological material by reducing washes.

Cambios moleculares en los márgenes de resección en el carcinoma de células escamosas de cavidad oral / Molecular changes in the resections borders in squamous cell cancer of oral cavity

Evaluación molecular de márgenes de resección en pacientes con carcinoma de células escamosas de cavidad oral sometidos a cirugía. 16 pacientes con carcinoma escamoso de cavidad oral, en cualquiera de sus localizaciones, sin tratamientos previos, intervenidos quirúrgicamente en el 2011. La pieza operatoria fue procesada por anatomía patológica a través del método tradicional, realizándose cortes adicionales que incluían: tumor y 0,5 cm de margen no tumoral. Se realizó hematoxilina-eosina y complementó con inmunomarcaje para p53, PCNA, Ki-67, factor de crecimiento epidérmico y receptor de crecimiento endotelial vascular. De los 16 pacientes en estudio la mayoría eran del género masculino, la edad promedio fue cercana a los 60 años, la mayoría eran pacientes consumidores de tabaco y alcohol. La lengua fue la localización más frecuente y los tumores se encontraban en un estadio avanzado (estadio III y IV). Estudio molecular: todos los marcadores evaluados se encontraban positivos en los márgenes de resección en el 93,75% de los pacientes. Los marcadores de proliferación celular como el PCNA y Ki-67 así como el p-53 se encontraban positivos entre 1,5 cm a 2 cm del tumor con un marcaje intenso. Por el contrario, el factor de crecimiento epidérmico el receptor de crecimiento endotelial vascular se encontraban positivos hasta 1,5 cm pero con menor intensidad. En el cáncer oral podemos observar con frecuencia cambios moleculares en el tejido aparentemente sano que rodea el tumor hasta por lo menos 15 mm.

The molecular evaluation of resection margins in patients with squamous cell carcinoma of oral cavity who underwent surgery. Field of cancerization concept. We included 16 patients with oral cavity squamous cell carcinoma in any of their locations,without pre treatment, surgically treated in our hospital in the 2011 year. The surgical specimen was processed by the pathology department of our institution, through the traditional method, additional sectioned including the tumor and at least 0.5 cm margin non tumorigenic. Study was performed hematoxylin eosin and was supplemented with immunostaining for p53, PCNA, Ki-67, epidermal growth factor receptor and vascular endothelial growth factor receptor. The most important features of the 16 patients studied were: The majorities were male, the average age was around 60 years old; most of them were tobacco and alcohol consumers. The tongue was the most frequent location and most of the tumors were in an advanced stage (stage III y IV). In molecular evaluation all the markers were positive in the resection margins in 93.75% of all patients. The cell proliferation markers suchas PCNA and Ki-67 and the p-53 were positive 1.5 cm to2 cm tumor with intense staining. Conversely, epidermal receptor grow factors and vascular endothelial grow factor receptor were positive up to 1.5 cm but with less intensity. In oral cancer can often observe molecular changes in the apparently healthy tissue surrounding the tumor to at least 15 mm.

Variaciones de la temperatura corporal de la interleuquina 6 y de la proteina C reactiva luego de la odontectomia de terceros molares / Changes in body temperature of the interleukin 6 and C-reactive protein after third molar odontectomy

Determinar las variaciones de la temperatura corporal, proteína C reactiva (PCR) y los niveles de Interleuquina 6 (IL-6) luego de la odontectomía de los terceros molares. Se seleccionaron 20 pacientes del Postgrado de Cirugía Bucal de la Facultad de Odontología de la Universidad Central de Venezuela, con indicación de extracción de los terceros molares retenidos y los cuales autorizaron por escrito su participación en el estudio. Los niveles de IL-6 fueron medidos por la prueba de ELISA, utilizando muestras de fluido crevicular gingival tomadas con puntas de papel estéril # 35, a las 0, 24, 48 horas y 7 días. Se realizó el registro de la temperatura corporal a las 0, 24, 48 horas y a los 7 días posteriores a la realización de la cirugía. Adicionalmente, se instruyó a los pacientes para la toma de la temperatura corporal cada 4 horas durante tres días consecutivos. Los niveles séricos de PCR se realizaron al tiempo 0 y a las 48 horas posteriores al acto quirúrgico. Se observó un aumento estadísticamente significativo en los niveles de IL-6, temperatura corporal y PCR luego de la odontectomía de los terceros molares. La elevación de la IL-6 se correlacionó en forma significativa con el incremento en la temperatura corporal y de la proteína C reactiva. La temperatura corporal, la IL-6 y la PCR aumentaron de manera directamente proporcional posterior al acto quirúrgico y en relación al trauma.

To determine variations in core body temperature, C-reactive protein (CRP) and interleukine-6 (IL-6) after surgical removal of third molars. Twenty patients who attended at the Oral Surgery Post grade in the Faculty of Dentistry, Universidad Central de Venezuela, for the extraction of the third molars. Informed consent was obtained from each patient. Samples of gingival crevicular fluid were collected with paper point # 35 at 0; 24 and 48 hours and at seventh day following to surgery, in order to measure IL-6 levels using ELISA test. The core body temperature was recorded at 0; 24; 48 hours and at 7th day after surgery. Additionally, the patients were instructed to register their temperature every 4 hours during three consecutive days. The CRP values were measured at time 0 and 48 hours later. Increase in IL-6, CRP and core body temperature values were observed after surgical extraction of third molars. The elevation of IL-6 was significantly correlated with the increase in CRP and body temperature. The core body temperature, IL-6 and CRP levels increased after surgical removal of third molars and were associated with the tissue damage.

Comparative analysis of three methods for HPV DNA detection in cervical samples / Análisis comparativo de tres métodos para la detección del ADN de VPH en muestras de cuello uterino

High risk HPV infection is considered to play a central role in cervical carcinogenesis. HPV DNA testing has shown to be a very useful tool for screening and following cervical infections. The aim of this study was to compare three methods for HPV DNA detection, along with cytology and colposcopy analysis. Cervical samples were collected from 100 sexually active women in Mérida, western Venezuela. HPV infection was screened using Hybrid-Capture 2 (HC2), L1-Nested-PCR and E6/E7-PCR assays. 40% of the samples (40/100) were HPV positive by at least one of the DNA detection methods. HC2 detected HPV in 12% specimens. L1- and E6/E7-PCRs showed 50% sensitivity and 77% specificity.The agreement rate between HC2 and both PCR assays was 65%. Kappa value showed moderate concordance between HC2 and both PCR methods (κ=0.55; CI 95%). Also moderate concordance was seen when L1- and E6/E7-PCRs were compared (κ=0.48; CI 95%). There was a significant association between the Schiller test and E6/E7-PCR (p=0.006) for HPV infection. An acceptable agreement between all three assays for HPV detection was observed. Nevertheless, different PCR formats need to be further analyzed in order to make the right choice of method for HPV testing.

La infección con VPH de alto riesgo es el principal factor etiológico asociado al desarrollo de carcinogénesis cervical y las pruebas de detección de ADN-VPH han mostrado ser una herramienta esencial para la pesquisa y seguimiento de estas infecciones. El objetivo del estudio ha sido comparar tres métodos para la detección del ADN viral, en combinación con los análisis colposcópico y citológico. Se obtuvieron muestras cervicales de 100 mujeres sexualmente activas, en Mérida, Venezuela. La detección de infecciones por VPH se realizó por Captura Híbrida 2 (CH2) y los ensayos de PCR “L1-Nested-PCR” y “E6/E7-PCR”. 40% de las muestras (40/100) fueron positivas para VPH por al menos uno de los métodos aplicados. 12% de las muestras analizadas fueron positivas para VPH por CH2. Las dos PCR utilizadas mostraron un 50% de sensibilidad y 77% de especificidad. La coincidencia observada entre CH2 y las dos PCR fue del 65%. La determinación del valor Kappa mostró una concordancia moderada entre CH2 y ambos métodos de PCR (κ=0,55; CI 95%). También existió concordancia moderada al comparar las PCR de las regiones L1 y E6/E7 de VPH (κ=0,48; CI 95%). Hubo una asociación significativa entre el resultado del test de Schiller y la PCR E6/E7 (p=0,006) para la infección por VPH. Se determinó una concordancia aceptable entre los tres métodos aplicados para la detección de VPH; sin embargo, las PCR deben ser analizadas en trabajos futuros con el fin de establecer las pruebas más adecuadas para la detección viral.

Detección de Virus Papiloma Humano en el fluido gingival de pacientes con inmunodeficiencia humana y enfermedad periodontal / Detection of Human Papillomavirus in gingival fluid of Venezuelan HIV patients with periodontal disease

Evidencias sugieren que los virus pueden participar en la activación de la enfermedad periodontal, permitiendo el sobrecrecimiento de bacterias periodontopatógenas. El objetivo del estudio fué la detección molecular de VPH en fluido gingival (FG) de pacientes VIH+ con enfermedad periodontal. Se evaluaron muestras de FG de 20 pacientes VIH+ con enfermedad periodontal que asistieron al Centro de Atención de Pacientes con Enfermedades Infecciosas (CAPEI) de la Facultad de Odontología de la Universidad Central de Venezuela, 13 bajo terapia antirretroviral (HAART) y 7 VIH+ sin HAART. Se incluyeron 7 pacientes seronegativos con periodontitis crónica y como grupo control 7 pacientes seronegativos periodontalmente sanos. Se extrajo el ADN, se amplificó la región L1 de VPH con primers MY09 y MY11. Las muestras VPH+ fueron genotipificadas para los tipos 6, 11, 16, 18, 31 y 45. VPH fue detectado en 46% de los pacientes VIH+ bajo terapia. El contaje CD4+ en la población VPH+ no presentó diferencias con el grupo VPH-, y la carga viral mostró valores promedio significativamente mayores (200.470± 324.244 copias/mL) con respecto a los pacientes VPH- (10.246±23.805 copias/mL). Las muestras VPH+ presentaron los genotipos 6 y 11, de los cuales 66,6% estaban coinfectados con ambos tipos. Las condiciones periodontales no presentaron diferencias entre los individuos con doble infección viral por VPH y VIH, y los que solo portaban VIH. VPH fue detectado solamente en fluido gingival de pacientes VIH+ con HAART, indicando que esta terapia puede influir en el estado inmunológico independientemente de las condiciones periodontales.

Evidence suggests that viruses may be involved in the activation of periodontal disease, allowing the overgrowth of periodontal pathogens. The purpose of the present study was to detect the presence of Human Papillomavirus (HPV) in gingival crevicular fluid (GCF) in HIV+ Venezuelan patients with periodontal disease. We evaluated GCF samples from 20 HIV+ patients with periodontal disease from the Infectious Disease Center, Faculty of Dentistry, Central University of Venezuela, and were clinically examined to establish their periodontal conditions, 13 under HAART (antiretroviral therapy) and 7 without HAART. Seven seronegative patients with chronic periodontitis and 7 seronegative patients, without periodontal disease were included. DNA extraction was performed, the consensus primers MY09 and MY11 for the HPV L1 region were used for PCR amplification. Genotipification was made for the 6, 11, 16, 18, 31 and 45 genotypes. HPV were detected in 46% of HIV+ patients under therapy. The CD4 cell counts in the HPV+ patients were not significantly different from the HPV-group. The viral load in the HPV+ group was significantly higher (200,470 ± 324,244 copy/mL) than in the HPV- patients (10,246 ± 23,805 copy/mL). Genotypes 6 and 11 were observed in the HPV positive samples, of which 4/6 (66.6%) presented coinfection with both types. No significant differences in the periodontal conditions were observed between patients with HPV-HIV infection related to patients with only HIV. HPV was detected only in the gingival crevicular fluid of HIV+ patients under HAART independently of the periodontal conditions.

Human papillomavirus and Epstein Barr virus in oral hairy leukoplakia among HIV positive Venezuelan patients

Oral hairy leukoplakia (OHL) is commonly found in individuals infected with HIV, and represents the most frequent oral manifestation. The purpose of this study was to detect the presence of Human Papillomavirus (HPV) and Epstein Barr Virus (EBV) in OHL of HIV+ Venezuelan patients. We evaluated 21 HIV+ adult patients with clinically present OHL lesions: 11 under antiretroviral therapy, 10 without therapy, and 10 oral mucosal samples as controls. Nested-PCR was used to detect EBV and HPV infection. The INNO-LiPA HPV Genotyping v2 was applied to determine the HPV genotype. The EBV genome was found in 16/21 (76%) of the HIV+ patients with OHL. No difference was observed in EBV+ and EBV- patients related to antiretroviral therapy viral load and CD4+ T cell count. HPV-DNA was observed in 7/21 HIV positive cases (33%). The HPV genotypes detected were: 6, 11, 31, 33, 52, and 56/74. The most frequently HPV found was genotype 6 in 7/7, while two cases were HPV-11 and two HPV-52. Of the positive cases, 5/7 (71%) presented co-infection with more than one HPV genotype and 4/7 (57%) had HPV coinfection with high and low risk types. No case was EBV or HPV positive in the control group. In this study, a higher EBV prevalence was observed in OHL-HIV+ patients, confirming the etiologic role in this entity. A considerable number of cases were positive for HPV infection, and many patients presented coinfection with more than one HPV genotype as well as the presence of high oncogenic risk HPV in OHL.

El proposito del presente estudio fue detectar la presencia de virus papiloma humano (VPH) y Epstein Barr (VEB) en Leucoplasia Vellosa Oral (LVO) de pacientes VIH positivos. Se evaluaron 21 pacientes adultos VIH positivos con lesiones clinicas presentes de LVO y 10 casos controles de mucosa sana. Para el diagnostico molecular de VPH y EBV se utilizo Nested PCR. La determinacion de los genotipos se realizo mediante el kit HPV INNO-LiPA genotyping v2. La presencia de genoma de VEB se demostro en un alto porcentaje (76%) en 16/21 de los pacientes VIH positivos con LVO. No se observo relacion entre los pacientes VEB+ y VEBcon el uso de terapia antirretroviral, la carga viral y el contaje de celulas T CD4+. Se demostro la presencia de ADN-VPH en 7/21 (8%) de los casos VIH positivos. Los genotipos de VPH detectados fueron 6, 11, 31, 33, 52, 56/74. El genotipo 6 fue el mas frecuentemente observado en 7/7, dos casos fueron VPH 11 y dos VPH 52. De los casos positivos 5/7 (71%) presentaron coinfeccion con mas de un genotipo de VPH y en 4/7 (57%) se evidencio coinfeccion con tipos de alto y bajo riesgo oncogenico. En el presente estudio se observo una alta prevalencia de VEB en pacientes VIH positivos con LVO, confirmando el papel etiologico en esta entidad. Un considerable numero de casos fueron positivos para VPH. Se observo la presencia de coinfeccion con mas de un tipo viral, asi como la presencia de VPH de alto riesgo.

Helicobacter pylori cagA and vacA genotypes in Cuban and Venezuelan populations

The aim of this study was to determine the presence of Helicobacter pylori cytotoxin-associated gene (cagA)/vacuolating cytotoxin gene (vacA) among patients with chronic gastritis in Cuba and Venezuela. Gastric antrum biopsies were taken for culture, DNA extraction and PCR analysis. Amplification of vacA and cagA segments was performed using two regions of cagA: 349 bp were amplified with the F1/B1 primers and the remaining 335 bp were amplified with the B7629/B7628 primers. The VA1-F/VA1-R set of primers was used to amplify the 259-bp (s1) or 286-bp (s2) product and the VAG-R/VAG-F set of primers was used to amplify the 567-bp (m1) or 642-bp (m2) regions of vacA. cagA was detected in 87 percent of the antral samples from Cuban patients and 80.3 percent of those from Venezuelan patients. All possible combinations of vacA regions were found, with the exception of s2/m1. The predominant combination found in both countries was s1/m1. The percentage of cagA+ strains was increased by the use of a second set of primers and a greater number of strains was amplified with the B7629/B7628 primers in the Cuban patients (p = 0.0001). There was no significant difference between the presence of the allelic variants of vacA and cagA in both populations. The predominant genotype was cagA+/s1m1 in both countries. The results support the necessary investigation of isolates circulating among the human population in each region.

Presence of human papillomavirus infection determined by hybrid capture assay in cervical lesions in a Venezuelan population

The aim of this study was to establish the presence of HPV infection in cervical lesions in a Venezuelan population, by Hybrid Capture Assay II (HCA II), and its association with cytological diagnosis. The study included 1483 cervical samples analysed at Laboratorios CITOMED, Caracas, Venezuela, from 2005 to 2007. The woman age range was between 20 and 58 years, and the mean age was 28.8. HPV infection was determined using HCA II. The cytological diagnosis of the smears showed LSIL in 1120/1483 samples (75.5 percent), HSIL in 354/1483 (23.9 percent) and ASC-US, in 9/1483 (0.6 percent). The positivity of HPV DNA detected by HCA II was 54.6 percent (811/1483). Of the positives cases, 138/811 (17 percent) presented HPV DNA of low oncogenic risk and 673/811 (82.9 percent) had high-risk HPV. There were significant differences in the low and high oncogenic HPV type frequencies of the evaluated samples (p>0.0001). Low risk HPV types were detected in 127 cases of LSIL, 9 of HSIL and 2 of ASC-US. High-risk HPV was detected in most of the cases: 361 LSIL, 308 HSIL and 4 ASC-US. Our study showed a high presence of cervical infection by human papillomavirus of a high risk genotype. Our results contribute to the epidemiological data that report diversity in the prevalence rates in different countries.

El objetivo de este estudio fue establecer la presencia de la infección por Virus Papiloma Humano en lesiones cervicales de un grupo de pacientes venezolanos, mediante el Ensayo de Captura Híbrida II (ECH II), y su asociación con el diagnóstico citológico. Se analizaron 1483 muestras de citología cervical procesadas en el Laboratorio CITOMED, Caracas, Venezuela desde 2005 hasta 2007. El rango de edad de las mujeres fue entre 20 y 58 años, siendo la edad promedio 28,8 años. Se determinó la presencia de la infección por VPH empleando el método de Ensayo de Captura Híbrida II (ECH II). El diagnóstico citológico de las muestras reveló la presencia de lesiones intraepiteliales de bajo grado (LIE BG) en 1120/1483 (75,5 por ciento) pacientes, lesiones intraepiteliales de alto grado (LIE AG) en 354/1483 (23,9 por ciento) y lesiones con células atípicas de significado indeterminado (ASCUS) en 9/1483 (0,6 por ciento). La positividad de la infección por VPH detectada por ECH II fue de 54,6 por ciento (811/1483). De los casos positivos, 138/811 (17 por ciento) tenían ADN-VPH de bajo riesgo oncogénico y 673/811 (82,9 por ciento) presentaron tipos de VPH de alto riesgo. Las diferencias observadas en la frecuencia de los tipos de VPH de alto y bajo riesgo oncogénicos detectados en las muestras fueron estadísticamente significativas (p<0,0001). VPH de bajo riesgo fue detectado en 127 casos de LIE BG, 9 de LIE AG y 2 de ASC-US, mientras que VPH de alto riesgo fue detectado en la mayoría de los casos: 361 de LIE BG, 308 de LIE AG y 4 de ASC-US. Nuestro estudio demostró una alta presencia de infección por genotipos de VPH de alto riesgo oncogénico. Estos datos contribuyen a establecer el patrón epidemiológico que reporta una gran diversidad en las tasas de prevalencia en diferentes países.

Detección de Candida Albicans en lesiones de leucoplasia vellosa bucal de un grupo de pacientes venezolanos VIH+ / Detection of candida albicans in lesions of oral hairy leukoplakia a group of HIV + patients in Venezuela

El objetivo del presente estudio fue determinar la prevalencia de la infección por Candida albicans en lesiones de Leucoplasia Vellosa Bucal (LVB) en un grupo de pacientes VIH+ en una muestra de la población venezolana. Para ello se evaluaron 21 pacientes adultos VIH+, con lesiones clínicas de Leucoplasia Vellosa Bucal, 11 con terapia antiretroviral y 10 sin terapia, y 10 pacientes adultos VIH- con lesiones hiperqueratósicas de la mucosa oral provenientes del Centro para la Atención de Pacientes con Enfermedades Infectocontagiosas de la Facultad de Odontología de la Universidad Central de Venezuela. Los pacientes fueron examinados clinícamente para la detección de lesiones presentes en la mucosa oral, confirmándose el diagnóstico con el estudio histopatológico. La infección por C albicans se determinó mediante biopsias de las lesiones para su estudio histopatológico empleando dos técnicas diferentes, coloración de Pass y método de Grocott, y cultivo microbiológico en medio Agar Sabouraud Resultados: En pacientes VIH+ según los distintos métodos empleados se pudo observar que mediante el cultivo en Agar Sabouraud 6/21 (29%) de los pacientes fueron positivos y 15/21 (71%) fueron negativos. Con respecto a la coloración de Grocott, todos los 21 pacientes fueron positivos, mientras que con la coloración de PAS, 17/21 (81%) de los pacientes fueron positivos y 4/21 (19%) fueron negativos. En el caso de los pacientes VIH- con leucoplasia bucal, 1/10 (10%) resultó positivo mediante el cultivo en Agar Sabouraud y 9/10 (90%) fueron negativos. Mediante la coloración de Grocott todos los pacientes (10) fueron negativos para la presencia del hongo, e iguales resultados fueron obtenidos con la coloración de PAS. Conclusión: Se observó una mayor prevalencia de la infección por C. albicans en pacientes VIH+ lo que demuestra que la presencia del hongo, constituye un factor fuertemente asociado a los pacientes con LVB

The aim of this study was to determine the prevalence of Candida albicans infection in Oral Hairy Leukoplakia (OHL) in Venezuelan HIV+ population. We evaluated 21 HIV+ adults patients with the clinical diagnosis of OHL, 11 under antiretroviral therapy, 10 without and 10 HIV negative adults with hyperkeratotic lesions on the oral mucosa as a control group, from the Center of Infectious diseases, Faculty of Dentistry, Central University of Venezuela. All patients were clinically examined and definitive histopathological diagnosis was made. C albicans was detected by two different histochemical methods: PAS and Groccot and microbiological culture using Agar Sabouraud medium. The results demonstrated that 6/21 (29%) patients were positive by microbiological culture and 15/21 (71%) were negative. All the patients were positive by Grocott special stain while 17/21 (81%) were positive using PAS. In the control group, 1 patient was positive by culture and 9/10 (90%) were negative. Additionally, all the patients were negative by Grocott and PAS. In conclusion, we observed a higher prevalence of C. albicans infection in HIV+ patients, suggesting that the presence of this microorganism may constitute an associated factor in OHL

Detección de VPH y expresión: de p53 en carcinoma de cabeza y cuello / HPV detection and expression: of p53 in head and neck carcinoma

El cáncer de cabeza y cuello ha sido frecuentemente asociado al abuso en el consumo del alcohol y tabaco, aunque existe un bajo porcentaje de casos que no presenta una historia de alcohol y/o tabaco conocida. Esto ha llevado a considerar la exposición a otros factores de riesgo como por ejemplo el virus de papiloma humano. Actualmente los oncólogos evalúan distintos marcadores oncogénicos, entre ellos la proteína p53, lo cual les permite realizar el pronóstico y diagnóstico más preciso. El objetivo de este estudio fue evaluar la infección de virus de papiloma humano en pacientes con carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello mediante reacción de cadena polimerasa, así como la detección de p53 por inmunohistoquímica. De 30 muestras evaluadas, 12 (40 por ciento) resultaron positivas para la detección viral, de éstas el 58 por ciento correspondía virus de papiloma humano tipo 11 (de bajo riesgo oncogénico), siendo la cavidad bucal la localización anatómica más afectada por la presencia del genoma viral. El p53 fue encontrado en 50 por ciento, siendo la orofaringe la localización anatómica con mayor positividad para dicho marcador.

The head and neck cancer has been frequently associated with the alcohol and tobacco abuse consume, although there are a low percents of cases that have not an alcohol and tobacco history know. This has made to consider another risks exposure factors how for example, the human papilloma virus. At present the oncologist evaluate different oncogenic markers inside them like the p53, this permit to them realize a better prediction and the prognostic. The objective of this study was evaluating the human papilloma virus infection in the patients with diagnostic of head and neck carcinoma using the polymerase reaction chain, such as the detection of the p53 by the immunohistochemistry procedure. Of the 30 evaluated samples 12 (40 %) of them result positive to the human papilloma viral detection, of these the 58 % correspond to the human papilloma virus type 11 (low oncogenic risk), been the oral cavity the anatomic localization most affected by the viral genome presence. The p53 has been finding in the 50 %, the orofaringe was the anatomic localization who has most positive to the marker.